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關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)在豬遺傳育種中的應(yīng)用
（作者未知） 2010/8/13
現(xiàn)代生物技術(shù)在豬的遺傳育種中有著廣闊的應(yīng)用前景。生產(chǎn)實(shí)踐表明，應(yīng)用生物技術(shù)可加速育種目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)，如提高生長(zhǎng)速度和繁殖率，改善胴體品質(zhì)等，同時(shí)也可起到降低成本，控制疾病，提高效益等多種效果，應(yīng)用前景十分廣闊。
1豬遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建
豬遺傳連鎖圖譜(1inkagemap)，既是遺傳研究的重要內(nèi)容，又是豬種資源、育種及分子克隆等許多應(yīng)用研究的理論依據(jù)和基礎(chǔ)。
高分辨遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建，使遺傳育種學(xué)家對(duì)根據(jù)圖譜定位數(shù)量性狀產(chǎn)生了濃厚的興趣。通過(guò)對(duì)親本和分離群體進(jìn)行標(biāo)記分析，所得資料用特定的統(tǒng)計(jì)分析處理，計(jì)算所有標(biāo)記多態(tài)位點(diǎn)的分離及獨(dú)立分配比例的卡方檢驗(yàn)和重組頻率的最大似然估值，則可建立標(biāo)記之間的連鎖圖譜。目前常用的定位方法有區(qū)間定位、最小二乘和復(fù)合區(qū)間定位法等。據(jù)報(bào)道，美國(guó)豬基因組研究計(jì)劃，已在豬的連鎖圖譜上構(gòu)建了2400多個(gè)標(biāo)記，其中大多數(shù)是微衛(wèi)星標(biāo)記。據(jù)晏兆莉等(1996)報(bào)道，Andersson等根據(jù)豬的基因圖譜，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)豬第4號(hào)染色體上存在一個(gè)QTL控制生長(zhǎng)速度和瘦肉率基因。Brascamp等研究表明，對(duì)生長(zhǎng)速度有重要影響的兩個(gè)基因分別位于染色體4和13上。決定瘦肉率性狀的兩個(gè)基因接近同一個(gè)位置，很可能是同一個(gè)基因。
2數(shù)量性狀主效基因的檢測(cè)與利用
Geldermann于1975年首先提出數(shù)量性狀基因•位點(diǎn)(QTL)的概念，Georges和Massey稱之為重要經(jīng)濟(jì)性狀基因位點(diǎn)(ETL)。主效基因是宏效QTL．QTL定位的重要用途是用于標(biāo)記輔助選擇(MAS)。一般認(rèn)為，主效基因大致可分為三類，一類是由分析數(shù)量性狀(或閾性狀)而判定明顯存在常染色體或性染色體的孟德?tīng)柣�，二類是一些遺傳缺陷基因．
基因往往是一因多效，如豬的氟烷基因，三類是根據(jù)連鎖圖譜與數(shù)量性狀的連鎖分析所確定的主效基因。
豬的氟烷基因(Ha1)是影響豬肉品質(zhì)的主效基因。如果豬體攜帶兩個(gè)陰性突變基因(irl1)就會(huì)發(fā)生應(yīng)激綜合征，這種隱性遺傳病會(huì)嚴(yán)重影響豬的存活率和豬肉品質(zhì)，導(dǎo)致豬的應(yīng)激死亡和產(chǎn)生劣質(zhì)肉(PSE肉)。令人遺憾的是，這個(gè)隱性基因與瘦肉有關(guān)，選擇瘦肉率會(huì)提高它的基因頻率。由于利用傳統(tǒng)的育種技術(shù)(如氟烷測(cè)定)，無(wú)法在種群中鑒別NN和Nn(雜合子)，也就無(wú)法根除這種遺傳病。Fujii等利用基因定位技術(shù)，證實(shí)了應(yīng)激綜合征座位是位于第6號(hào)常染色體上的蘭尼啶受體基因突變所致。蘭尼啶受體結(jié)構(gòu)與功能的改變，導(dǎo)致豬應(yīng)激時(shí)骨骼肌鈣離子非正常釋放而可能引起應(yīng)激綜合征。用PCR或PCR—RFLP，方法可以清楚地得到3種不同基因型的DNA圖譜，這給豬育種中檢測(cè)出氟烷敏感基因(Nn和111)個(gè)體帶來(lái)了極大的方便。
RN基因已經(jīng)被證明是分布在漢普夏豬體中影響肉質(zhì)的一個(gè)主要基因，控制肌肉酸度，是一個(gè)估計(jì)腌制火腿加工質(zhì)量的性狀。法國(guó)學(xué)者LeRoy在漢普夏豬及其雜種豬中分離出這個(gè)低pH和影響火腿質(zhì)量的基因(命名為RN基因)。發(fā)現(xiàn)RN基因在肌肉中可增加70％左右的糖原含量和降低火腿質(zhì)量，是一個(gè)不利的顯性基因，該效應(yīng)被稱為漢普夏效應(yīng)�，F(xiàn)已將其定位于15號(hào)染色體上。
3數(shù)量性狀的標(biāo)記輔助選擇
在豬的育種選擇中，對(duì)遺傳力較低(如繁殖性狀)、度量費(fèi)用昂貴(如抗病性)，表型值早期難以測(cè)定(如瘦肉率)或限性表現(xiàn)(如產(chǎn)奶量)的性狀，采用標(biāo)記輔助選擇(MAS)，則可提高選擇的有效性和遺傳改進(jìn)量。MAS是通過(guò)對(duì)遺傳標(biāo)記的選擇，間接實(shí)現(xiàn)對(duì)控制某性狀的QTL的選擇，從而達(dá)到對(duì)性狀進(jìn)行選擇的目的；或者通過(guò)遺傳標(biāo)記來(lái)預(yù)測(cè)個(gè)體基因型或育種值。例如，豬產(chǎn)仔數(shù)是一個(gè)低遺傳力(0．1左右)的數(shù)量性狀，法國(guó)用30多年時(shí)間來(lái)改良這個(gè)性狀，進(jìn)展甚微；而丹麥用了50多年時(shí)間才將每胎產(chǎn)仔數(shù)提高了1．0頭0 Rothschild等發(fā)現(xiàn)雌激素受體(ESR)是豬產(chǎn)仔數(shù)的主效基因之一，該座位在中國(guó)梅山豬合成系中可以控制1．5頭總產(chǎn)仔數(shù)和l頭活仔數(shù)。也就是說(shuō)，雌激素受體座位就是豬產(chǎn)仔數(shù)的一個(gè)QTL，而不僅僅是DNA標(biāo)記。陳克飛等不但證實(shí)了Rothschild等人的研究結(jié)果，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)了另一個(gè)控制豬產(chǎn)仔數(shù)的主效基因座位(FSH)，可控制2．0頭總產(chǎn)仔數(shù)和1．5頭活產(chǎn)仔數(shù)。
雖然，MAS可提高選擇的有效性和遺傳改進(jìn)量，但MAS的效能亦受性狀遺傳力、選擇強(qiáng)度、被選群體大小、遺傳標(biāo)記與QTL的連鎖程度等因素的影響。因此，要提高M(jìn)AS的效能，必須獲得與QTL緊密連鎖的遺傳標(biāo)記。可以預(yù)見(jiàn)，隨著更多與QTL緊密連鎖遺傳標(biāo)記的發(fā)現(xiàn)，MAS在實(shí)際育種工作中將會(huì)得到更多、更有效的應(yīng)用。
4精子分離
目前有兩種方法可分離精子：一是根據(jù)X與Y精子中DNA含量（未完，下一頁(yè)）
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