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紅細(xì)胞沉降率測(cè)定
（作者未知） 2010/8/19
【關(guān)鍵詞】紅細(xì)胞沉降 測(cè)定
紅細(xì)胞沉降率是指紅細(xì)胞在一定條件下的沉降速度，簡(jiǎn)稱(chēng)血沉，是反映紅細(xì)胞聚集性的一項(xiàng)常用指標(biāo)。它以抗凝全血中紅細(xì)胞的自然沉降速率表示結(jié)果。由于紅細(xì)胞含蛋白量比血漿高，比重大于血漿，因此在離體抗凝血中能自然下沉。
血沉的檢測(cè)方法有多種，ICSH推薦魏氏法為血沉測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)方法。傳統(tǒng)手工法只能測(cè)定血沉某個(gè)時(shí)刻的最終結(jié)果，特異性差，不能為臨床提供更多、更有價(jià)值的參數(shù)，使其應(yīng)用有很大的局限性。自動(dòng)血沉儀可動(dòng)態(tài)記錄整個(gè)血沉過(guò)程的變化，描繪出紅細(xì)胞沉降的曲線，為臨床分析血沉測(cè)定結(jié)果提供了新的手段。下面介紹紅細(xì)胞沉降率的儀器測(cè)定法。
一 Westergren法
將抗凝血置于特制的血沉管中，觀察紅細(xì)胞在一定時(shí)間內(nèi)沉降的距離，稱(chēng)為紅細(xì)胞沉降率，簡(jiǎn)稱(chēng)血沉(Erythrocyte Sedimentation Rata，ESR)。紅細(xì)胞沉降率測(cè)定有多種方法，WHO(LAB／86.3)推薦Westergren法，現(xiàn)將該法介紹如下。
(一)原理
抗凝血置于特制的血沉管中，垂直豎立l小時(shí)，觀察紅細(xì)胞下沉的速度，用血漿段的高度(mm)來(lái)表示。影響ESR的因素很多。其中最重要的因素是紅細(xì)胞緡錢(qián)狀的形成。因?yàn)榧t細(xì)胞形成緡錢(qián)狀或成團(tuán)后總面積減少，所承受的血漿阻力也減少，下降的速度要比單個(gè)分散的紅細(xì)胞快得多。影響緡錢(qián)狀形成的主要因素有：
1.血漿中各種蛋白的比例：一般認(rèn)為，血沉加快主要是血漿中各種蛋白成分比例的改變，而與總蛋白濃度無(wú)關(guān)。白蛋白帶負(fù)電荷，球蛋白與纖維蛋白原帶正電荷，正常情況下，血漿蛋白所帶的正、負(fù)電荷呈平衡狀態(tài)，而紅細(xì)胞因細(xì)胞膜表面的唾液酸而帶負(fù)電荷，彼此排斥間距約為25nm，較為穩(wěn)定。如血漿中纖維蛋白原或球蛋白含量增加或白蛋白含量減少，改變了電荷的平衡，致使紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷減少，容易使紅細(xì)胞形成緡錢(qián)狀而血沉加快。相反，如血漿纖維蛋白原減少或白蛋白增加時(shí)，血沉減慢�，F(xiàn)已公認(rèn)，血漿中帶有正電荷的不對(duì)稱(chēng)的大分子物質(zhì)纖維蛋白原是最強(qiáng)有力的促緡錢(qián)狀聚集的物質(zhì)，其次為γ球蛋白，再次為α、β球蛋白。此外膽固醇、甘油三酯也有促進(jìn)紅細(xì)胞形成緡錢(qián)狀的作用。而白蛋白及卵磷脂有抑制的作用。
2.紅細(xì)胞的數(shù)量和形狀：正常情況下，紅細(xì)胞沉降率和血漿回流阻逆力保持一定的平衡狀態(tài)，如紅細(xì)胞數(shù)量減少，會(huì)造成總面積減少，所承受的血漿逆阻力也減少，因此血沉加快。但數(shù)量太少則影響聚集成緡錢(qián)狀，使血沉的加快與紅細(xì)胞減少程度不成比例。反之紅細(xì)胞增多時(shí)血沉減慢。紅細(xì)胞直徑愈大血沉愈快，球形紅細(xì)胞不易聚集成緡錢(qián)狀，血沉減慢。
3.血沉管的位置：血沉管傾斜時(shí)，紅細(xì)胞沿管壁一側(cè)下沉，而血漿沿另一側(cè)上升，使血沉加快。
(二)試劑及材料
1.109 mmol／L枸櫞酸鈉(32 g／L Na3C6H5O7•2H2O，AR)。
2.魏氏血沉管：長(zhǎng)300±1.5 mm，內(nèi)徑2.5-2.7 mm(誤差不得超過(guò)±0.05 mm)，管上刻有200 mm刻度，可容血液1 ml左右。
3.血沉管架。
(三)操作
1.取枸櫞酸鈉抗凝劑0.4 ml，加入玻璃小瓶中。
2.取靜脈血1.6 ml立即加入上述玻璃小瓶中混勻。
3.用魏氏血沉管吸血到刻度“0”處，管內(nèi)不應(yīng)有氣泡。
4.把血沉管垂直固定在血沉架上，1小時(shí)后讀取紅細(xì)胞沉降的毫米數(shù)，即為紅細(xì)胞沉降率。
二 自動(dòng)血沉測(cè)定儀檢測(cè)
所有自動(dòng)血沉測(cè)定儀的原理和方法都是建立在魏氏法的基礎(chǔ)上，采用光學(xué)阻擋原理進(jìn)行測(cè)量的。紅細(xì)胞在自身血漿中的沉降曲線呈s形，紅細(xì)胞沉降曲線可由方程表示：
H∞是血漿層的極限高度(t→∞)，t50是血漿層高度為H∞／2的時(shí)刻，β為常數(shù)(β﹥1)。沉降速度則表示為：V=dh／dt求此方程極限，得到紅細(xì)胞沉降的最大速度。
通過(guò)對(duì)紅細(xì)胞沉降時(shí)間過(guò)程的記錄，以及采用非線性最小二乘擬合方法，得到紅細(xì)胞沉降曲線(H-T曲線)和多個(gè)參數(shù)。Vmax表示在整個(gè)紅細(xì)胞沉降過(guò)程中所能達(dá)到的最大沉降速度，它與紅細(xì)胞在聚集期形成的聚集體大小、血漿蛋白種類(lèi)與含量、血漿黏度及紅細(xì)胞的形態(tài)和變形性等因素有關(guān)。tmax表示紅細(xì)胞沉降從聚集期過(guò)渡到恒定沉降期的時(shí)間，此時(shí)紅細(xì)胞聚集達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡，此后聚集體將不再繼續(xù)生長(zhǎng)。t50反映了紅細(xì)胞沉降從恒定沉降期向紅細(xì)胞堆積期過(guò)渡的特征，它與紅細(xì)胞在這兩個(gè)時(shí)期中的動(dòng)力學(xué)變化有關(guān)。H∞表示在紅細(xì)胞堆積期(t→∞)紅細(xì)胞所能達(dá)到的最大沉降距離，它與紅細(xì)胞堆積期紅細(xì)胞間相互作用有（未完，下一頁(yè)）
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