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當(dāng)前位置：課件009首頁 >> 職教研究 >> 專業(yè)論文 >> 甜菜堿對脂肪組織釋放游離脂肪酸和抗氧化能力的影響

甜菜堿對脂肪組織釋放游離脂肪酸和抗氧化能力的影響 （作者未知）　2010/8/30 （接上頁）/ L，其中CaCl2在溶液稀釋后再加入，以免發(fā)生沉淀。MDA，T�睞OC測定試劑盒：購自南京建成生物工程研究所（批號為：20080924）。 　　 1.2 動物清潔級，健康，SD大鼠50只，雌雄各半，體質(zhì)量（250±20）g，蘭州大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗中心提供。 　　 2 方法 　　 2.1 實驗分組 　　 正常對照組，加入0.9%的生理鹽水；鹽酸腎上腺素組，加入10-6 mol/L鹽酸腎上腺素；藥物組，分別應(yīng)用低劑量為10-7 mol/L，中劑量為10-6 mol/L和高劑量為10-5 mol/L的甜菜堿；機制探討組，中劑量的甜菜堿分別加上10-5 mol/L的心得安，異搏定和SQ22，536。實驗時，大鼠脫臼處死，迅速取出腹膜后的脂肪組織，稱重，每份脂肪塊重量約(50.0±2.0) mg，然后剪成小塊，置于37℃含小牛血清白蛋白（0.04 g/ml）的2 ml Krebs液中溫育，在溫育液中分別加入不同濃度的甜菜堿及阻斷劑，加入藥物容量各為20 μl。脂肪組織溫育過程中持續(xù)通入95% O2和5% CO2的混合氣體，使溶液的pH值保持在7.4。標(biāo)本溫育90 min后，吸取其溫育上清液，用一次提取比色法測定FFA的含量；用TBA比色法測定MDA含量和比色法測定T�睞OC的含量。 　　 2.2 觀察指標(biāo)及統(tǒng)計學(xué)處理FFA（μmol/L）=(OD測定管－OD空白管)/(OD標(biāo)準(zhǔn)管－OD空白管)×1000。 　　 MDA(nmol/ml) =(OD測定管－OD測定空白管)/ (OD標(biāo)準(zhǔn)管－OD標(biāo)準(zhǔn)空白管)×標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 　　 T�睞OC(IU/ml)=（OD測定管－ OD對照管）/0.01/30×3.7×1。 　　 所有數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計軟件SPSS11.5處理，實驗數(shù)據(jù)以 ±s表示，各組之間的比較用單因素方差分析，以P﹤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 　　 3 結(jié)果 　　 3.1 甜菜堿及阻斷劑加甜菜堿對大鼠離體脂肪組織釋放FFA的影響 　　 見表1。與正常對照組相比，鹽酸腎上腺素明顯促進大鼠離體脂肪組織釋放FFA（P=0.000）；低劑量的甜菜堿對FFA的釋放無明顯的促進作用（P=0.367）；而中，高劑量的甜菜堿可明顯促進FFA釋放（均為P=0.000）。與中劑量的甜菜堿組相比，用心得安阻斷β受體，異搏定阻斷L型Ca2+ 通道和抑制腺苷酸環(huán)化酶后，均部分降低了甜菜堿促進離體脂肪組織釋放FFA的作用，分別降低了19.03%，18.38%，15.47%（分別為P=0.000，P=0.000，P=0.001）。表1 甜菜堿及阻斷劑加甜菜堿對大鼠離體脂肪組織釋放FFA的影響(略) 　　 3.2 甜菜堿對大鼠離體脂肪組織MDA和T�睞OC的影響 　　 見表2。與正常對照組相比，鹽酸腎上腺素明顯降低了MDA，升高了T�睞OC（均為P=0.001）；甜菜堿組的MDA降低了41.87%（P=0.000），而T�睞OC升高了40.54%(P=0.039) 。加心得安，異搏定和SQ 22，536后，MDA與甜菜堿組相比卻分別升高了25%，33.66%和21.53%（均為P=0.000），而T�睞OC卻分別降低了46.15%，51.92%，44.23% (分別為P=0.001，P=0.000，P=0.003)。這說明阻斷劑明顯抑制了甜菜堿降低MDA，升高T�睞OC的作用。表2 甜菜堿對大鼠離體脂肪組織MDA和FAOC的影響(略) 　　 4 討論 　　 貯存在脂肪細(xì)胞中的脂肪，被激素敏感性脂肪酶（HSL）逐步水解為FFA及甘油并釋放入血液以供其他組織氧化利用，該過程稱為脂肪動員。在脂肪動員中，脂肪細(xì)胞內(nèi)HSL起決定性作用，它是脂肪分解的限速酶。脂肪細(xì)胞膜上存在多種受體，如α2，β1，β2。β腎上腺素能受體有促進脂肪分解的作用。近年在肥胖脂肪細(xì)胞的細(xì)胞膜上又發(fā)現(xiàn)了β3腎上腺素能受體（β3�瞐drenergic receptor， β3�睞R），在白色脂肪組織的脂肪分解和棕色脂肪組織的特殊產(chǎn)熱過程中發(fā)揮著重要作用。β3�睞R是一種G蛋白耦聯(lián)的膜表面受體，具有調(diào)節(jié)脂肪分解和能量消耗的重要作用［4］。Tomita 等［5］研究發(fā)現(xiàn)腎上腺素能受體激動劑（β3Ara）可通過改變一些細(xì)胞因子的水平而發(fā)揮促進脂解、減少脂肪堆積的作用。本實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)鹽酸腎上腺素可顯著促進脂肪組織釋放FFA，與上述理論是一致的。脂肪細(xì)胞上還存在許多酶，如：腺苷酸環(huán)化酶，它是細(xì)胞膜上的G蛋白效應(yīng)器酶之一，可催化胞內(nèi)的ATP生成環(huán)-磷酸腺苷(cAMP)。當(dāng)鹽酸腎上腺素與β腎上腺素能受體結(jié)合后，與之耦聯(lián)的Gs蛋白上的AC被激（未完，下一頁） 　　 頁碼選擇：1　2　3　4

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