|
殼聚糖水凝膠的制備工藝及其對(duì)蛋白質(zhì)吸附的影響
何業(yè)盈 2012/12/30 14:15:32
（接上頁(yè)）血清蛋白(電泳單點(diǎn)純) ,α2淀粉酶(食品級(jí)) ,醋酸、磷酸、鹽酸和NaOH(均為化學(xué)純) .套式恒溫器,機(jī)械攪拌機(jī),恒溫水浴槽,紫外2可見(jiàn)分光光度計(jì).
2. 實(shí)驗(yàn)原理與方法
甲殼素(chitin) 脫乙酰度的測(cè)定,用堿量法.
蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定:在280 nm 波長(zhǎng)下,用紫外光度法測(cè)定.
酶活力測(cè)定:用終點(diǎn)色對(duì)比法進(jìn)行測(cè)定.
3. 實(shí)驗(yàn)步驟
（1）殼聚糖的制備
殼聚糖由甲殼素與質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50 %的NaOH反應(yīng)而得,反應(yīng)溫度控制在110 ℃左右,不同的反應(yīng)時(shí)間下制得不同脫乙酰度的殼糖.
（2）殼聚糖水凝膠的制備
將制得的殼聚糖溶于酸性水溶液中,再滴入堿性水溶液中得粒狀殼聚糖水凝膠,最后用水洗至中性備用.
（3）殼聚糖水凝膠吸附實(shí)驗(yàn)
將殼聚糖水凝膠裝入分離柱;蛋白或酶上柱后,用蒸餾水洗脫,洗出液每2 mL 收集一次,逐次承接,洗出液在280 nm 下進(jìn)行紫外測(cè)定.
參考文獻(xiàn)
[1]蔣挺大. 甲殼素[M]. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2001.
[2]楊新超,趙祥穎,劉建軍. 殼聚糖的性質(zhì)、生成及應(yīng)用[J ] . 食品與藥品,2005 ,7 (8) :59262.
[3]唐振興,錢(qián)俊青. 殼聚糖凝膠的制備及應(yīng)用研究[J ] . 浙江工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2005 ,33 (6) :6102613.
[4]唐振興,錢(qián)俊青,石陸娥. 殼聚糖凝膠吸附蛋白質(zhì)機(jī)理研究[J] .精細(xì)化工,2004 ,21 (11) :8322730.
|