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芹菜甲素對D-半乳糖衰老模型小鼠的作用
（作者未知） 2009/10/11
摘要 目的 研究芹菜甲素對D-半乳糖所致小鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降和各項衰老指標(biāo)的對抗作用，以期探討芹菜甲素的抗衰老作用機制。方法 以D-半乳糖衰老模型小鼠為實驗對象，以其體重、免疫器官重量，肝腦丙二醛（MDA）和脂褐素(LF)的含量，全血谷胱苷肽過氧化氫酶(GSH-PX)、紅細(xì)胞過氧化氫酶(CAT)和腦中超氧化物歧化酶(SOD)的活力為指標(biāo)，全面考察芹菜甲素的抗衰老作用。結(jié)果 芹菜甲素(20，40mg.kg-1,ig),能對抗連續(xù)6周給D-半乳糖（5%，0.25ml.（10g）-1）所致小鼠腦組織中LPO、LF含量的升高，提高全血GSH-PX、、紅細(xì)胞CAT和腦中SOD的活力，并對抗小鼠體重、脾臟及胸腺指數(shù)下降。 結(jié)論 芹菜甲素能有效地對抗D-半乳糖所致的小鼠多項衰老指標(biāo)的出現(xiàn)，促進(jìn)衰老小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。
關(guān)鍵詞 芹菜甲素 D-半乳糖 衰老 小鼠
芹菜甲素（butyl-phthalide）是從傘形科植物芹菜中提取分離的有效成分，藥理研究[1]表明，芹菜素有降壓、鎮(zhèn)靜、抑菌等作用。但目前對其促智和抗衰老作用研究較少，本文采用D-半乳糖衰老模型小鼠考察了芹菜甲素的抗衰老和促智作用。
1 材料
1.1 動物 昆明種小鼠（合格證號：SCXK(魯)20040013）♂，體質(zhì)量18～22g，由山東大學(xué)實驗動物中心提供。
1.2 藥品與試劑 芹菜甲素：濟寧醫(yī)學(xué)院中藥室提供，批號：060412。D-半乳糖：Sigma公司生產(chǎn)，上海生化試劑公司分裝，批號：060824。羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）：天津市密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心生產(chǎn)，批號20070113，用蒸餾水配成1%的溶液。.GSH-PX、CAT、SOD測定試劑盒均為南京建成生物工程研究所提供，批號：20070215。
1.3 儀器 WFZ800-D2型紫外可見分光光度計，北京第二光學(xué)儀器廠；HITACHI650-60型熒光分光光度計，日本； 721分光光度計，上海第三分析儀器廠.
2 方法
2.1 D-半乳糖衰老模型的建立[2] 皮下注射5%D-半乳糖,0.25ml.10g-1；正常組皮下注射等體積的生理鹽水；每天一次，連續(xù)6周。
2.2 給藥方法 取健康♂小鼠40只，隨機分為正常組、模型組、給藥組。各給藥組灌胃給予芹菜甲素(50、100mg.kg-1);正常組和模型組ig等體積的1%CMC-Na；給藥同時造模，最后一天灌胃和注射D-半乳糖2h后，進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶訓(xùn)練實驗，次日測定記憶成績。然后處死測定各項衰老指標(biāo)。
2.3 D-半乳糖衰老模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的測定（跳臺法）[3] 將動物放入跳臺箱內(nèi)適應(yīng)3min，然后立即通36V交流電。動物受到電擊，其正常反應(yīng)是跳回平臺以躲避傷害性刺激，如此訓(xùn)練5min。 24h后重做測驗，此即記憶保持測驗。記錄小鼠第一次跳下平臺的潛伏期和5min內(nèi)的錯誤次數(shù)。
2.4 D-半乳糖衰老模型小鼠腦組織MDA、LF含量測定[2] 小鼠斷頭處死，立即取腦，用硫代巴比妥酸（TBA）法測定組織丙二醛（MDA）的含量；用熒光法測定腦組織中LF的含量。
2.5 D-半乳糖衰老模型小鼠全血GSH-PX、紅細(xì)胞CAT和腦中SOD活力的測定 小鼠末次給藥后第二天眼眶取血，斷頭處死取全腦，分別按試劑盒說明測定GSH-PX、CAT和SOD
2.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計學(xué)方法統(tǒng)計學(xué)方法
采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包。實驗數(shù)據(jù)均為三次實驗的平均值，采用Univariate進(jìn)行分析，各處理之間差異采用Duncan檢驗，以P＜0.05為顯著性差異，P＜0.01表示極顯著性差異。
各組數(shù)據(jù)采用 ±S表示，組間比較采用t檢驗。
3結(jié)果
3.1芹菜甲素對衰老模型小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響 與正常對照組相比，模型組小鼠記憶明顯衰退，表現(xiàn)為錯誤次數(shù)增加，潛伏期縮短（均P﹤0.01）。與模型組比較，芹菜甲素（50，100mg.kg-1）可使小鼠錯誤次數(shù)明顯減少，潛伏期明顯延長。（表2）
Tab 2芹菜甲素對衰老模型小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響
The effect of Butyl-phthalide on the deficit of learning and memory induced by D-galactose on mice in step-down test ( ±S ,n=10)
組別 劑量/mg.kg-1 錯誤次數(shù) 潛伏期/s
空白組 - 0.75±0.23 200.5±（未完，下一頁）
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