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熱毒清膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究
（作者未知） 2010/5/25
（接上頁）色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。結(jié)果見圖2。
2.1.3 重樓的薄層色譜鑒別
取本品粉末2 g，加乙醚10 ml，浸漬20 min，取乙醚浸漬過的殘渣揮干，加甲醇10 ml，超聲處理30 min，濾過，濾液揮干，殘渣加水4 ml使溶解，移入分液漏斗中，加水飽和的正丁醇8 ml，輕輕振搖3 min，靜置30 min，取上層液加水4 ml，輕輕振搖3 min，靜置30 min，取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇4 ml使溶解，作為供試品溶液。另取重樓對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。吸取上述兩種溶液各5～1 0 μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(7∶3∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘烤數(shù)分鐘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。結(jié)果見圖3。
2.2 定量測定
2.2.1 測定成分的選擇與依據(jù)熱毒清膠囊以重樓、南板藍(lán)根、冰片、蒲公英、甘草等藥材經(jīng)加工制成的中藥制劑，具有清熱解毒，消腫散結(jié)之功，用于熱毒內(nèi)盛所致的腮腺炎、扁桃腺炎、喉頭炎、上呼吸道感染等癥。重樓為方中的君藥，具有清熱解毒，消腫止痛，涼肝定驚之功，其所含有效成分重樓皂苷I（C51H82O20）和重樓皂苷II（C44H70O16），因此我們選擇方中君藥重樓進(jìn)行含量測定研究，為控制該產(chǎn)品的質(zhì)量提供保障，以重樓皂I為對照品用高效液相色譜法測定本品中重樓皂苷I的含量。
2.2.2 色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)
用十八烷基鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水（42∶58）為流動相［2］；檢測波長為210 nm。理論板數(shù)按重樓皂苷I峰計算應(yīng)不低于4 000。
2.2.3 對照品溶液的制備
精密稱取在40℃減壓干燥2 h的重樓皂苷I對照品19.80 mg，置25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得（每毫升中含重樓皂苷Ⅰ為0.792 mg）。
2.2.4 供試品溶液的制備
取本品1 g，精密稱定，置50 ml具塞錐形瓶中，精密加入乙醇溶液25 ml，密塞，搖勻，稱定重量，超聲處理30 min，取出，放冷，再稱定重量，用乙醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，取上清液，用微孔濾膜（0.45 μm）濾過，即得。
2.2.5 含量測定方法學(xué)考察實(shí)驗(yàn)
2.2.5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍考察分別精密吸取上述對照品溶液0.5，1，2.5，4，5 ml，置5 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。按“2.2.2”項(xiàng)下的色譜條件分別進(jìn)樣10μl測定。以重樓皂苷I對照品進(jìn)樣量(mg)為橫坐標(biāo)(X)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)(Y)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖4。回歸方程y = 1.528 5×103X - 3.800 7(r=0.999 9)。結(jié)果表明：當(dāng)進(jìn)樣量在0.079 2～0.792 0 mg范圍內(nèi)時，重樓皂苷Ⅰ進(jìn)樣量與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。
2.2.5.2 精密度實(shí)驗(yàn)
取熱毒清膠囊（040905批），按“2.2.2”項(xiàng)下的色譜條件，進(jìn)樣量10 μl，連續(xù)測定5次。結(jié)果表明5次測定峰面積平均值為：453.17，RSD為0.64%（n=5）。實(shí)驗(yàn)表明，本法的精密度良好。
2.2.5.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
對同一供試品溶液（040905批），每隔一定時間測定1次，共測定5次，每次進(jìn)樣10 μl，5次測定的蜂面積平均值為464.89，RSD為0.84%（n=5），結(jié)果供試品在8 h內(nèi)測定結(jié)果無明顯變化，表明供試品在8 h內(nèi)，被測物穩(wěn)定。
2.2.5.4 陰性對照實(shí)驗(yàn)取缺重樓的陰性對照樣品，約1 g，精密稱定，按供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液，“2.2.2”項(xiàng)下的色譜條件測定。結(jié)果，陰性對照品在重樓皂苷I峰位置無色譜峰出現(xiàn)，表明處方中其它成分對測定無干擾，結(jié)果見圖5。
2.2.5.5 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)
對同一批樣品（040905批），平行測定5份， 5份測定結(jié)果的平均值為：3.8622 mg/g，RSD =1.15%（n=10），結(jié)果表明，本法的重復(fù)性較好。
2.2.5.6 加樣回收率測定
取本品（批號040905，重樓皂苷I含量3.8622 mg/g）約0.5 g，取5份，精密稱定，置50 ml具塞錐形瓶中，分別精密加入對照品溶液（含重樓皂苷10.792 mg/ml）2.5 ml，混勻，烘干（80℃），精密加入乙醇溶液25 ml，密塞，搖勻，稱定重量，超聲處理30 min，取出，放冷，再稱定（未完，下一頁）
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