抑肝纖及拆方對肝纖維化大鼠肝組織TGF-β1,PAI-1蛋白表達(dá)的影響
(作者未知) 2010/5/25
抑肝纖及拆方對肝纖維化大鼠肝組織TGF-β1,PAI-1蛋白表達(dá)的影響
【摘要】 目的探討抑肝纖及拆方對肝纖維化大鼠肝組織TGF-β1,PAI-1蛋白表達(dá)的影響。方法采用四氯化碳(CCl4)法復(fù)制大鼠肝纖維化模型,應(yīng)用免疫組化方法觀察抑肝纖及拆方對肝纖維化模型大鼠肝組織TGF-β1,PAI-1表達(dá)的影響。結(jié)果各組動物治療后,肝組織TGF-β1,PAI-1蛋白表達(dá)量均有不同程度的降低,其中抑肝纖全方組較其他用藥組下降明顯。結(jié)論中藥復(fù)方抑肝纖及拆方可有效防治大鼠肝纖維化,尤以抑肝纖全方作用最佳,其作用機(jī)制可能是通過抑制肝纖維化組織TGF-β1,PAI-1蛋白的表達(dá)實現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】 肝纖維化 中醫(yī)治法 TGF-β1 PAI-1 免疫組化
Abstract:Objective To investigate the influence of Yiganxian decoction and its separated decoction on the expression of TGF-β1 and PAI-1 protein in liver tissue of hepatic fibrosis in rats . MethodsLiver fibrosis model rats were induced by carbon tetrachloride, the expression and localization of TGF-β1 and PAI-1 in liver tissue were analysed by the method of immunohistochemistry. ResultsAfter treatment with medication, the positive expression of TGF-β1 and PAI-1 protein in liver tissue was decreased at different levels. Yiganxian decoction was better than other groups.ConclusionYiganxian decoction and its separated decoction can effectively prevent and treat the liver fibrosis in rat model. Yiganxian decoction is the most effective. Its mechanism may be related with inhibiting the expression of TGF-β1 and PAI-1 in liver fibrosis tissue.
Key words:Liver fibrosis; Herbal therapy; TGF-β1; PAI-1; Immunohistochemistry
肝纖維化是肝臟對各種因素所致的慢性損傷的一種修復(fù)反應(yīng),是大多數(shù)慢性肝病所共有的病理過程,也是各種慢性肝病向肝硬化過度的中間環(huán)節(jié),其特征是細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)在肝內(nèi)過度沉積[1]。
中藥復(fù)方抑肝纖是王繼教授治療肝病的經(jīng)驗方,我們在前期實驗研究中業(yè)已證實抑肝纖對肝纖維化有一定抑制、逆轉(zhuǎn)作用[2]。本實驗按中醫(yī)治療原則進(jìn)行拆方研究,觀察抑肝纖全方及拆方對肝纖維大鼠肝組織TGF-β1,PAI-1蛋白表達(dá)的影響,旨在從更深層次上探討抑肝纖方的抗肝纖維化作用機(jī)理及組方規(guī)律。
1 材料
1.1 動物
健康雄性Wistar大鼠48只,清潔級,體重(200±20) g,購自河北醫(yī)科大學(xué)動物實驗室。
1.2 用藥
無菌40%四氯化碳(CCl4)花生油溶液,購自天津化工二廠。抑肝纖全方及拆方藥物購于河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院門診部,由白求恩國際和平醫(yī)院藥劑科水煎,濃縮制備。抑肝纖全方由黃芪、 白術(shù)、丹參、川芎、鱉甲、牡蠣等7味中藥組成,煎劑生藥含量為3 g/ml,拆方組丹參、川芎煎劑生藥含量為0.69 g/ml,黃芪、白術(shù)煎劑生藥含量為1.38 g/ml, 鱉甲、牡蠣煎劑生藥含量為0.7 g/ml。各治療組大鼠生藥用量均按相當(dāng)于成人口服劑量的10倍計算。
1.3 試劑
轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)免疫組織化學(xué)染色試劑盒:購于北京中山生物技術(shù)有限公司;兔抗大鼠血漿酶原激活酶抑制因子-1,羊抗兔IgG購于武漢博士德生物工程有限公司。 (未完,下一頁)
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