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天然牛黃對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠腦細(xì)胞外液能量代謝及海馬組織SOD活性與MDA含量的影響
（作者未知） 2010/5/25
（接上頁(yè)）定位術(shù)將大鼠用10%水合氯醛麻醉(3 ml·kg-1, ip ),剃毛，暴露頭頂皮膚，立體定位儀固定，開(kāi)皮，分離皮下組織，暴露頭骨，確定前囪位置，以鉆孔器在大鼠海馬CA1區(qū)(坐標(biāo):AP 3 mm, ML 1.5 mm, DV 3.5 mm )上鉆一直徑為1.5 mm的小孔，并將CMA/12探針套管插入，牙托粉固定。手術(shù)過(guò)程中，用CMA/150動(dòng)物溫度控制器將大鼠體溫控制在37℃。
2.3 微透析取樣術(shù)后24 h，在動(dòng)物清醒自由活動(dòng)狀態(tài)下，拔出套管內(nèi)芯，插入CMA/12探針，將大鼠放入CMA/120動(dòng)物清醒裝置內(nèi)。探針的進(jìn)出口端分別連接2條聚乙烯管，進(jìn)口管連接CMA/102微透析泵，出口管連接CMA/170低溫收集器。CMA/102微透析泵的灌流速度為1.5 μl·min-1，灌流液為林格氏液。探針插入后灌流1h使其平衡，取得穩(wěn)定的基礎(chǔ)值。給藥前收集1個(gè)樣本，以此樣本的檢測(cè)值作為給藥前基礎(chǔ)值。樣本收集時(shí)在4℃下進(jìn)行，收集的樣本立即放入-70℃低溫冰箱內(nèi)保存待測(cè)。
2.4 能量代謝產(chǎn)物的測(cè)定利用CMA600微透析自動(dòng)分析生化儀和相應(yīng)試劑盒對(duì)所收集的透析液進(jìn)行成分含量測(cè)定。透析液中的GLU、Lac和Pyruvate分別在葡萄糖氧化酶、乳酸脫氫酶、丙酮酸脫氫酶的作用下和試劑反應(yīng)，生成苯醌二酰亞胺(quinonediimine),根據(jù)苯醌二酰亞胺的含量可計(jì)算透析液中3種物質(zhì)的相應(yīng)濃度。
2.5 SOD活性及MDA含量的測(cè)定給藥后8 h將SHR斷頭處死，迅速剝離大鼠的海馬組織，稱(chēng)重，加9倍體積的冰生理鹽水，在冰浴下研磨，制成10%腦勻漿。3 000 r/min離心10 min，取上清液，按試劑盒操作測(cè)定SOD活性含量及MDA含量。
2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用SPSS10.2軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，數(shù)據(jù)用±s表示，前后比較用配對(duì)t檢驗(yàn)，組間比較用單因素方差分析。
3 結(jié)果
3.1 牛黃對(duì)于SHR腦細(xì)胞外液能量代謝的影響
3.1.1 牛黃對(duì)SHR海馬細(xì)胞外液GLU的影響
對(duì)照組海馬細(xì)胞外液GLU水平在6h內(nèi)呈現(xiàn)了逐漸降低的趨勢(shì)。與對(duì)照組相比，牛黃各組GLU含量均有不同程度的升高，但均未表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)意義：其中牛黃0.04 g/kg組在給藥后6 h內(nèi)始終高于對(duì)照組；牛黃0.02，0.08 g/kg組則在給藥后3～6 h均高于對(duì)照組水平，牛黃0.08 g/kg組起效相對(duì)較晚，但升高的幅度較大。結(jié)果見(jiàn)表1。表1 牛黃對(duì)SHR海馬細(xì)胞外液GLU的影響（略）
3.1.2 牛黃對(duì)SHR海馬細(xì)胞外液Lac含量的影響
對(duì)照組海馬細(xì)胞外液Lac水平呈現(xiàn)了逐漸升高的趨勢(shì)。牛黃各組則表現(xiàn)出不同程度的降低海馬細(xì)胞外液Lac水平的作用，與對(duì)照組相比，牛黃0.02 g/kg組在給藥后3～4 h開(kāi)始出現(xiàn)顯著性差異( P﹤0.01)，并且這種趨勢(shì)逐漸加大；牛黃0.04 g/kg在給藥后1～2 h開(kāi)始出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P﹤0.05)；牛黃0.08 g/kg組在藥后3～4 h左右開(kāi)始出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P﹤0.01)，且該組下降幅度大于其它兩組。結(jié)果見(jiàn)表2。表2 牛黃對(duì)SHR海馬細(xì)胞外液Lac的影響（略）
3.1.3 牛黃對(duì)SHR海馬細(xì)胞外液L/G的影響
對(duì)照組海馬細(xì)胞外液L/G水平表現(xiàn)為持續(xù)增高的趨勢(shì)。牛黃各組都顯示出了明顯的降低海馬細(xì)胞外液L/G水平的作用。與對(duì)照組相比，在所觀察的6h范圍內(nèi)，牛黃0.02 g/kg組始終維持較低水平,并在給藥后3～4 h開(kāi)始出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P﹤0.01）；牛黃0.04 g/kg組在給藥后1～2 h即有明顯降低,在給藥后3～6 h出現(xiàn)了顯著差異( P﹤0.01)；牛黃0.08 g/kg組L/G水平在給藥后1～2 h開(kāi)始持續(xù)明顯降低,并在3～6 h出現(xiàn)了統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P﹤0.01）。牛黃0.08 g/kg組下降時(shí)間滯后，但3～6 h的下降幅度大于其它兩組。結(jié)果見(jiàn)表3。表3 牛黃對(duì)SHR海馬細(xì)胞外液L/G的影響（略）
3.1.4 牛黃對(duì)SHR海馬細(xì)胞外液L/P 的影響
對(duì)照組海馬細(xì)胞外液L/P水平在6h內(nèi)并無(wú)明顯變化。牛黃各組均表現(xiàn)出不同程度的降低海馬細(xì)胞外液L/P水平的作用，與對(duì)照組相比，牛黃0.02 g/kg組在給藥后1～2 h即有明顯降低( P﹤0.05)，隨后顯著性逐漸加大(P﹤0.01)。牛黃0.04 g/kg組降低趨勢(shì)明顯，并在給藥后5－6h開(kāi)始出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P﹤0. 01)；牛黃0.08 g/kg組L/P水平降低的時(shí)相較晚，但趨勢(shì)明顯,在藥后3～4 h即明顯低于對(duì)照組水平( P﹤0.05),且這種趨勢(shì)在逐漸加大。結(jié)果見(jiàn)表4（未完，下一頁(yè)）
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