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雷公藤甲素對體外培養(yǎng)的變應(yīng)性接觸性皮炎小鼠Th細(xì)胞Fas表達(dá)的影響
（作者未知） 2010/5/25
雷公藤甲素對體外培養(yǎng)的變應(yīng)性接觸性皮炎小鼠Th細(xì)胞Fas表達(dá)的影響
【摘要】 目的為了探討雷公藤甲素對體外培養(yǎng)的變應(yīng)性接觸性皮炎（ACD）小鼠Th細(xì)胞Fas表達(dá)的影響。方法以二硝基氯苯（DNCB）制作小鼠ACD模型，分離ACD小鼠淋巴細(xì)胞，不同濃度雷公藤甲素體外作用48 h后，利用流式細(xì)胞儀檢測Th細(xì)胞Fas表達(dá)率。結(jié)果雷公藤甲素3個濃度組體外培養(yǎng)的ACD小鼠淋巴細(xì)胞Fas表達(dá)均高于對照組（P＜0.01），高濃度組與中濃度和低濃度比較Fas表達(dá)水平顯著升高（P＜0.01），中濃度與低濃度比較表達(dá)水平差異具有顯著性（P＜0.05）。結(jié)論雷公藤甲素可以促進(jìn)體外培養(yǎng)的ACD小鼠淋巴細(xì)胞Fas的表達(dá)，可能是治療ACD的機(jī)理之一。
【關(guān)鍵詞】 雷公藤甲素 接觸性皮炎 T細(xì)胞
Abstract:ObjectiveTo study the effect of Triptolide on Fas Expression of T helper in Cultured T lymphocyte in mice with Allergic Contact Dermatitis (ACD). MethodsThe mouse model of ACD was established by sensitizing the skin of Kunming mice with dinitrochlorobenzen(DNCB). Lymphocyte was isolated from MICE spleen, and cultivated in vitro with 0.1, 1.0, 10 μmol/L concentration of Triptolide for 48 hours, then the Fas expression of T helper was detected by flow cytometry.ResultsThe expression of T helper in the three groups was higher than that in the control group, and those in the 10 and 1.0 μmol/L concentration groups were higher than that in the 0.1 μmol/L concentration group.ConclusionIt may be one of mechanism to treat ACD that Triptolide can down regulate the Fas expression of T helper in Cultured T lymphocyte in mouse model of ACD.
Key words:Triptolide; Allergic Contact Dermatitis; T helper cell
雷公藤制劑因其獨(dú)特的抗炎、免疫調(diào)節(jié)作用被廣泛應(yīng)用于多種皮膚疾病的治療，雷公藤甲素（Triptolide）又稱雷公藤內(nèi)酯醇、雷公藤內(nèi)酯，是從衛(wèi)矛科雷公藤屬雷公藤、昆明山海棠等植物中分離出來的一種含有3個環(huán)氧基的二萜內(nèi)酯化合物，是雷公藤制劑的主要有效成分之一。本項目擬通過以下實(shí)驗探討雷公藤甲素對體外培養(yǎng)的變應(yīng)性接觸性皮炎（ACD）小鼠T輔助細(xì)胞（Th）細(xì)胞Fas表達(dá)影響。
1 器材
1.1 動物
6～8周齡昆明鼠，雄性，體重18～22 g，由天津醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗動物研究室提供。
1.2 儀器
超凈工作臺（蘇凈公司，蘇州）；CO2培養(yǎng)箱（Thermo公司，德國）；倒置顯微鏡(OLYMPUS，日本)；流式細(xì)胞儀(FACSCallibur，BD公司，美國）；臺式高速離心機(jī)(北京醫(yī)用離心機(jī)廠)；24孔細(xì)胞培養(yǎng)板。
1.3 試劑
RPMI-1640培養(yǎng)液（Gibco公司）；胎牛血清（中國醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院血液病研究所）；青霉素、鏈霉素（晶美生物工程有限公司，深圳）；丙酮、2，4-二硝基氯苯（DNCB）（天津市化學(xué)試劑公司），PHA-P（Sigma，美國）；PE anti-mouse CD95（Fas/APO-1）熒光抗體；APC-Cy7 anti-mouse CD4熒光抗體。雷公藤甲素標(biāo)準(zhǔn)品購自福建醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所藥物室。
2 方法
2.1 ACD小鼠模型制作實(shí)驗當(dāng)日剪除小鼠背部3 cm2毛，暴露皮膚，在去毛處皮膚外涂5% DNCB；10 d后，小鼠耳廓內(nèi)外兩側(cè)外涂1% DNCB 30 μl；1周后重（未完，下一頁）
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