|
高效液相色譜法測定骨康口服液中補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的含量
（作者未知） 2010/5/25
高效液相色譜法測定骨康口服液中補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的含量
【摘要】 目的建立骨康口服液中有效成分的含量測定方法。方法采用HPLC法測定骨康口服液中有效成分含量。結(jié)果補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素兩種成分均達(dá)到良好分離，在測定范圍內(nèi)線性良好，回收率均在99%～101%之間。結(jié)論所建立的定量方法簡便可行、重復(fù)性好，可作為骨康口服液的質(zhì)量監(jiān)控。
【關(guān)鍵詞】 骨康口服液 補(bǔ)骨脂素 異補(bǔ)骨脂素 高效液相色譜法
Abstract:ObjectiveTo establish a method of HPLC for determining psoralen and isopsoralen in Gukang Oral Liquid. MethodsThe effective components in Gukang Oral Liquid were determined by HPLC. ResultsThe resolution and the linearity were fine with the rate of recovery of psoralen 99.96%,RSD＝1.16%; the recovery rate of isopsoralen was 100.09%,RSD=0.60%.ConclusionThe quantitative method for determining the ingredients of Gukang Oral Liquid is simple, feasible and repeatable, and can be used for quality control of Gukang Oral Liquid.
Key words:Gukang Oral Liquid; Psoralen; Isopsoralen; HPLC
骨康口服液由補(bǔ)骨脂、淫羊藿、肉蓯蓉、白芍、黃芪等10味藥材組成，具有補(bǔ)腎壯骨，活血通絡(luò)，健脾益氣的功效， 臨床上主要用于治療婦女更年期引起的骨質(zhì)疏松癥。骨康口服液復(fù)方共煎，有利于補(bǔ)骨脂素與異補(bǔ)骨脂素的煎出［1,2］，故采用水提醇沉工藝制備［3］。鑒于補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素可相互轉(zhuǎn)化［4,2］，原標(biāo)準(zhǔn)采用TLCS法測定補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素兩者的總量［5］。但TLCS法變異大，故選用HPLC法同時(shí)測定骨康口服液中補(bǔ)骨脂素與異補(bǔ)骨脂素的含量�，F(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下：
1 儀器與試藥
DIONEX SUMMIT高效液相色譜儀（PDA-100檢測器、STH585柱溫箱、P680 HPLC泵、ASI-100自動(dòng)進(jìn)樣器）,Chromeleon色譜工作站；補(bǔ)骨脂素（供含量測定用，110739-200309）、異補(bǔ)骨脂素(供含量測定用，110738-200410)，均由中國藥品生物制品檢定所提供；骨康口服液（批號(hào)：20061009，20061012，20061015），由廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥開發(fā)研究中心提供；乙腈為色譜純（Merck，1192230）其他試劑均為分析純。
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件
色譜柱：Phenomenex luna C18柱(250 mm×4.60 mm，5 μm)；流動(dòng)相：以乙腈為流動(dòng)相A，以0.1%冰醋酸為流動(dòng)相B，按表1中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；檢測波長：246 nm；流速：1.0 ml·min-1；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10 μl；理論塔板數(shù)均不低于3 000。
2.2 溶液的制備
2.2.1 對(duì)照品溶液的制備
精密稱取補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品適量，分別置25 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，以此作為對(duì)照品貯備液。精密吸取上述各對(duì)照品貯備液適量，加甲醇制成每毫升含補(bǔ)骨脂素35 μg，異補(bǔ)骨脂素44 μg的混合溶液，搖勻即得。
2.2.2 供試品溶液的制備
取本品10支，混勻，精密吸取藥液10 ml，加乙醚提取4次，10 ml/次，分取乙醚層，60℃揮干乙醚, 用甲醇溶解殘?jiān)�，并轉(zhuǎn)移至5 ml容量瓶中，用甲醇加至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液即得。
2.2.3 陰性對(duì)照溶液的制備
取處方中除補(bǔ)骨脂外的其余成分制成缺補(bǔ)骨脂陰性對(duì)照品，按“2.2.2”項(xiàng)下的供試品制備方法處理得缺補(bǔ)骨脂陰性對(duì)照液。
2.3 線性關(guān)系考察
精密吸取對(duì)照品溶液2，4，6，8，10，14μl進(jìn)行色譜測定，按上述色譜條件測定峰面積，并以峰面積（Y）對(duì)進(jìn)樣量（X）進(jìn)行回歸，補(bǔ)骨脂素在70～490 ng范（未完，下一頁）
|